在学习基因工程时，经常会遇到这类题镀铜目，如下：

例一：

现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图l。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切镀铜，结果如图3。该DNA分子的结构及其酶切图谱是 （     ）

很多同学表示做这个题目时，看不懂图123，明明是三段为什么说酶H只有一个切点？明明2000bp大些为什么那么短？难道有什么玄机吗？实际上要镀铜看懂这个图需要学习下电泳。

琼脂糖凝胶电泳

电泳(electrophoresis)是带电物质在电场中向着与其电荷相反的电极移动的现象。各种生物大分子在一定的pH条件下，可以解离成带电荷的离子，在电场中会向镀铜相反的电极移动。在分析核酸、蛋白质等生物大分子时，电泳是一个非常有效的手段。含有电解液的凝胶在电场中，其中的电离子会发生移动，此时移动的速度可因电离子大小、形态及电荷量的不同而有差异。利用移动速度差异镀铜，就可以区别各种大小不同的分子。

琼脂糖凝胶电泳是分子生物学实验室中分离鉴定核酸的常规方法。核酸是两性电解质，其等电点为pH2-2.5，在常规的电泳缓冲液中(pH约8.5)，核酸分子带负电荷，在电场中向镀铜正极移动。线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比，分子越大则所受阻力越大，也越难于在凝胶孔隙中移动，因而迁移得越慢。

下面看小编的实验：

点样孔在负极（黑色的），点样，镀铜通电，DNA往正极（红色的）跑。跑胶开始，出现了一条带↑DNA带负电，往正极跑。（从左向右）

出现两条带了，由于有两种染色剂，染色剂可以直观看出对应大小的DNA所跑的位置.（指示剂不是给DNA染色，只是镀铜和相应的DNA大小相同，所以可以显示出相当于DNA跑的位置，因为DNA在自然光下看不见）↑

DNA在紫外光下呈现出亮光。结果：从下往上第一条带是无DNA的空带，所以无荧光，第6和第7条带是小编的实验结果镀铜，2.3季4.5徐8.9.10.蒋11（0后）标准。很不错。↑

例一解释：

下面咱们来解释下例一的图123：

从上面的分析很容知道这个图的2000bp和1000bp指的是2000bp和1000bp大小的DN镀铜A所在的位置，由于分子越大跑的越慢，所以图示点样孔应在图的上侧，即负极在上侧，DNA从上侧往下侧跑。由图1可知H酶将3000bp的线性DNA切成两段，即一个切点，由图2可知B酶将3000bp的线性DN镀铜A切成三段，即由两个切点。由图3可知，用酶H和1酶B同时酶切，结果得400bp、600bp、1400bp三种大小的DNA片段，400+600+1400=2400bp，而该DNA分子有3000bp，所以镀铜可以断定还有一个600bp的DNA片段。（因为相同大小的DNA所跑的位置一样，所以两段600bp的DNA在相同的位置）

再与选项对比，只有A符合题意。

在看几个题：

例二：

在DNA 测序工作中，需要将某些限镀铜制性内切酶的限制位点在 DNA上定位，使其成为 DNA 分子中的物理参照点。这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制酶 HindⅢ，BamHⅠ和二者的混合物分别降解一个 4kb（1镀铜kb即1千个碱基对）大小的线性DNA 分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如下图所示。

据此构建这两种限制性内切酶在该DNA分子上的“限制酶图谱”如乙图，请判断正确的标示是（ 镀铜   ）

A.  2.8         B.  Hind Ⅲ        C.   0.3      D.    BamHⅠ

答案：C

例三：

现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸镀铜内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRI、KpnI同时酶切后得到200 bp和600 bp两种长度的DNA镀铜分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是的（ ）

答案：D

例四：

基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点镀铜是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是（    ）

A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

D．目的基因和质镀铜粒均用限制酶Ⅱ切割

答案：A

另一类似的题目：

例五：

细菌蛋白质在极端环境条件下可通过肽链之间的二硫键维持稳定。已知不同的多肽产物可因分子量不同而以电泳方式分离。下列左图是一个分析细菌蛋白的电泳结果图，“-镀铜”代表没加还原剂，“+”代表加有还原剂，还原剂可打断二硫键，“M”代表已知分子量的蛋白质，右侧数字代表蛋白质或多肽的相对分子量。根据左侧结果，下列哪个图案0能代表该细菌原本的多肽结构（注意：“一”代表镀铜二硫键）（    ）

解析：本题是有关多肽结构的判断。从左图可以看出该多肽的分子量大约是130，打断二硫键后的片段中，较小的片段分子量大约是30，较大的片段分子量大约是70。由此可以判断打断二硫键后的片镀铜段中有两个较小的片段、一个较大的片段（分子大小相同的分子电泳时跑在相同的位置），所以选项B是正确的。

答案：B

来个与遗传结合的：

例六：

下图1是某家族中甲病（显性基因为A，隐性基因为a）和乙病（显性基因为镀铜B，隐性基因为b）两种遗传病的系谱图。控制甲乙两种遗传病的基因分别位于两对同源染色体上。经DNA分子结构分析，发现乙病基因与其相对应的正常基因相比，乙病基因缺失了某限制酶的切点。图2表示甲、乙、丙3人镀铜的乙病基因或相对应正常基因的核酸分子杂交诊断结果示意图。据图回答下列问题。

（1）从系谱图上可以看出甲病的遗传特点是___________；若Ⅱ7和Ⅱ8再生一个患甲病子女的概率为____________镀铜_。

（2）已知对Ⅱ3和Ⅲ13进行核酸分子杂交诊断，Ⅱ3电泳结果与图2中甲相同，Ⅲ13电泳结果与图2中乙相同，则由此可以判断乙病的遗传方式是___________，9号个体的基因型是__________镀铜_。

（3）若Ⅱ8进行核酸分子杂交诊断，其电泳结果与乙相同。则Ⅲ9和Ⅲ12结婚，生育的子女患病的概率为___________。

（4）目前已发现的人类遗传病有数千种，其中的多基因遗传病常表现出______镀铜_____等特点。

答案：

(1)代代相传(发病率高)　　3/4

(2)常染色体隐性　aaBB或aaBb

(3)25／36

(4)易受环境因素的影响，群体中的发病率比较高，家旗聚集现象(答对其中两点得1分)

解释镀铜：

正常基因有3个某限制酶切点，经酶切后产生两个DNA片段，突变基因只有两个某限制酶切点，经酶切后产生一个DNA片段。

甲电泳后有三种DNA片段，说明甲代表杂合子；乙电泳后有两中DNA片段，说明乙代表正常镀铜基因的纯合子；丙电泳后只有一种DNA片段，说明丙代表突变基因的纯合子。

例七：

如图为DNA测序仪显示的某真核生物DNA片段一条链的碱基排列顺序图片，其中图甲的碱基序列已经解读，其顺序是： GGTTATG镀铜CGT。图乙的碱基序列为：(　　)

A．GGTTATGCGT     B．CCAATACGCA       C．GATGCGTTCG      D．GCTTGCGTAG

答案：C